Анализ кала на антиген хеликобактер пилори: как сдавать, расшифровка результатов, преимущества и недостатки

Девочки всем привет, как обычно делюсь с Вами своими советами и опытом молодой мамы, хочу рассказать о Анализ кала на Helicobacter pylori. Возможно некоторые детали могут отличаться, как это было у Вас. Всегда необходимо консультироваться у специалистов. Естественно на обычные вопросы, обычно можно быстро найти профессиональный ответ на сайте. Пишите свои комменты и замечания, совместными усилиями улучшим и дополним, так чтобы все поняли как разобраться в том или ином вопросе.

Многое зависит от метода диагностики, к которому прибегали специалисты при выявлении хеликобактер. Несовершенными типами исследования признаны культуральный и иммунологический способы, поскольку каждый из них не учитывает ряд нюансов, связанных с обнаружением патологических бактерий.

• Культуральное исследование. Предполагает введение полученного биоматериала в питательную среду, способствующую размножению колониальных организмов. Идентифицированные представители хеликобактер пилори изучаются с применением различного рода химических красителей и лекарственных средств. Последние позволяют установить степень чувствительности хеликобактер к разным видам препаратов.
• Иммунологический способ. К определенному количеству испражнений добавляют раствор с содержанием специальных белковых структур (антител), которые активно реагируют на наличие опасных антигенов хеликобактер, давая диагностам понять, что соответствующая проба заражена патогенными бактериями.
• ПЦР (или полимеразная цепная реакция). Данный способ подразумевает выделение «вражеской» ДНК за счет особых ферментов с дальнейшим удвоением частицы дизоксирибунуклеиновой кислоты. Искусственная репликация ДНК осуществляется до тех пор, пока не будет получен полноценный генетический код, который затем сравнивают с имеющимся образцом хеликобактер пилори.

Применение лекарственных средств

• атрофический гастрит;
• дуоденит (воспаление двенадцатиперстной кишки);
• диспепсия (несварение);
• лимфома желудка;
• железодефицитная анемия;
• болезнь Менетрие (патологическое утолщение слизистых желудочных оболочек с дальнейшим поражением желез внутренней секреции, которое приводит к образованию множественных кист и аденом);
• злокачественные образования, локализующиеся в ЖКТ;
• тромбоцитопения (резкое снижение количества кровяных пластинок);
• язва двенадцатиперстной кишки или желудка;
• дисплазия кишечника.

• выявлено нулевое количество бактерий или хеликобактер отсутствует;
• если количество микроорганизмов больше нуля — подтверждается хелибактериоз;
• знак S означает чувствительность к заявленному антибиотику;
• R — указывает на устойчивость (резистентность) к препарату;
• I — чувствительность умеренная.

Суть иммунологического анализа — выявление комплексов антитело+антиген, в котором чужеродным агентом является хеликобактерия. Более привычно использование по исследованию крови. Но фактически косвенные признаки наличия антигена можно подтвердить по наличию в стуле, слюне, моче, у беременных в околоплодной жидкости.

Недостатки метода

Иммунологические тесты показывают отрицательный результат, если антиген возбудителя не определяется, положительный — при наличии хеликобактериоза. Достоверность иммунологического и культурального методов значительно уступает ПЦР, для их проведения необходима массивная распространенность возбудителя в фекалиях.

Результаты исследования полимеразной цепной реакции могут зафиксировать в крови образцы ДНК Helicobacter pylori, что ставит ПЦР-тест на первое место среди всех методов диагностики. Положительный результат теста доказывает наличие бактерии в организме, отрицательный – ее отсутствие. Единственное, что недоступно при выполнении анализ крови на ПЦР – определение времени внедрения бактерии в организм.

Иммуноферментный анализ назначают, чтобы оценить уровень концентрации антител к хеликобактер пилори в крови пациента. Если в крови имеются антитела к бактерии, значит, иммунитет выработал их не менее 1-2 недель назад. Если реакция организма еще не сформирована, возможен ложноотрицательный результат.

Иммуноглобулины в крови LgG, LgM, LgA

Данный анализ даёт общее представление о возбудителе инфекции, поскольку на сегодняшний день считается одним из самых точных. Представленные спиралевидные микроорганизмы обитают зачастую в нижнем отделе желудка, а также в двенадцатиперстной кишке. Такие анаэробные микробы мгновенно погибают на воздухе. Зачастую заболевание передается от инфицированного человека к здоровому через слизь и слюну, а также бытовым путем. Попав в новый организм, бактерии спускаются непосредственно в желудок.

Этот метод считается сегодня перспективным. В особенности, когда речь идёт о дизентерии. ПЦР на определение микроба в кале затруднено, так как наличие специфических компонентов препятствует протеканию реакции.

• Сроки исследования занимают от 6 до 12 дней
• Дорогостоящие среды для высевания хеликобактерий
• Специфические условия для сред, обеспечивающие рост колонии, которые сложно воспроизвести в лаборатории
• Редкая встречаемость S-образных форм бактерии в испражнениях, пригодных для роста в питательных условиях (кокковые формы не исследуют)

Как правильно сдавать анализ?

Неопровержимым видом обследования является цитологическое исследование образца слизистой желудка, полученного при биопсии во время фиброгастроскопического исследования. При высокой разрешающей возможности микроскопа лаборант видит окрашенную хеликобактерию.

Серологические тесты, как и метод РТ-ПЦР, имеют некоторые ограничения. Так, результат анализа зависит от особенностей иммунного ответа пациента. Иммунный ответ пациентов, принимающих цитостатические препараты, и пожилых людей характеризуется пониженной выработкой специфических антител (любых, в том числе к H. pylori). По этой причине во избежание диагностических ошибок серологические тесты целесообразно дополнять прямыми тестами. Эта особенность была учтена при составлении комплексного анализа на H. pylori.

Анализ кала

Небольшое количество ложноотрицательных результатов может быть связано с нарушением методики взятия и хранения проб выдыхаемого воздуха, физической нагрузкой накануне и в процессе выполнения теста. Как и при большинстве других тестов, достоверный результат УДТ может быть получен после 2-недельной отмены ИПП и не ранее чем через 4 нед после прекращения приема антибиотиков и препаратов висмута. Консенсус Маастрихт V оценивает УДТ с меченой мочевиной как лучший способ диагностики НР с высокой чувствительностью и специфичностью и с отличной производительностью как для первичной диагностики инфекции, так и для оценки эффективности эрадикации [10].

Анализ крови

Несмотря на то что уровень антител в процессе успешной эрадикации падает, серологическая реакция остается положительной в течение ряда лет. Этот «серологический рубец» не позволяет использовать серологическое исследование крови для оценки эффективности лечения (причина ложноположительных результатов). Кроме того, серологический метод мало информативен у пациентов со слабым иммунным ответом, а антитела IgG появляются не ранее чем через месяц после инфицирования (причина ложноотрицательных результатов).
Преимуществом серологического метода для первичной диагностики НР является возможность его использования у лиц, принимающих ИПП и антибиотики [10], а также после состоявшегося желудочно-кишечного кровотечения и при атрофии СОЖ. Все перечисленные ситуации ассоциированы со снижением бактериальной «нагрузки», ввиду чего остальные диагностические тесты могут дать ложноотрицательный результат [39].

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза — фермент, ускоряющий процесс.

Кому рекомендуется проверить анализ кала на хеликобактерию?

При исследовании антибактериальной чувствительности колоний микробов на питательных культурах, было выявлено, что самые подходящие препараты для бактерий ин витро, «не работали», оказывались малоэффективными при лечении пациента.

Антиген H.pylori в фекалиях

• сдавать кал на анализ не раньше, чем через 1 месяц после последнего приема антибиотиков;
• в течение 3-х суток, предшествовавших сбору материала, нельзя употреблять красящие продукты (чай, кофе, красные и оранжевые фрукты и овощи, куркуму, карри, соевый соус),
• исключить грубую клетчатку – капусту, редьку, редис, перловую кашу, отруби, свеклу;
• нельзя принимать лекарства, усиливающие моторную функцию кишечника – Лактулозу, Мотилиум и подобные;
• отказаться от алкоголя;
• не принимать антацидных средств (Альмагель и подобные);
• собирать материал в течение первой недели после возникновения симптомов болезни (далее концентрация хеликобактера в кале уменьшается).

Проведенная после биопсии цитология слизистой оболочки дает два возможных качественных значения: отрицательный результат или норма (бактерий не обнаружили) и положительный (если выявили хоть одну бактерию хеликобактер пилори).

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Что означает сдать иммуноферментный анализ крови (ИФА) на бактерию хеликобактер пилори?

Анализ кала на антиген хеликобактер пилори ПЦР характеризуется высокой точностью (93-95%). Однако следует учитывать, что после эрадикации болезнетворной бактерии из организма данный анализ еще длительное время будет оставаться положительным за счет отхождения фрагментов ДНК погибших бактерий.

Чтобы собрать материал, необходимо использовать специальный контейнер. Его можно приобрести в лаборатории или аптеке. Не следует заполнять емкость полностью, достаточно будет поместить в нее не более ½ ч. ложки кала. Это составит около трети контейнера.

Положительный анализ не всегда говорит о том, что обнаруженный в кале хеликобактер активен. Он может указывать и на его присутствие в состоянии покоя. Дифференциация возможна только при получении результатов исследования крови на Helicobacter pylori методом ИФА.

Другие методы обнаружения паразита

• исключить прием антибиотиков за 30 дней до обследования;
• за 3-5 дней до сбора материала не использовать в пищу продукты, способные изменить цвет фекалий (черную смородину, красную свеклу и вино);
• отказаться в этот же период от употребления блюд, приготовленных из мяса, рыбы капусты, свеклы, редиса, моркови;
• следует также исключить прием лекарственных средств, вызывающих ускорение процесса дефекации, так как они провоцируют изменение каловых масс и влияют на результаты.

Кроме того, достоинством способа является его неинвазивность — отсутствие необходимости применять для забора материала более или менее травматичные процедуры (прокола вены для взятия крови, введения дуоденального зонда).

Кому рекомендуется проверить анализ кала на хеликобактерию?

• Относительно высокую стоимость анализа.
• Сохранение фрагментов ДНК микроба в фекалиях и после эрадикации. Даже если лечение успешно пройдено и бактерия отсутствует в организме, ещё спустя какое-то время фрагменты ДНК обнаруживаются в биологическом материале и стул тест на хеликобактер может дать положительный результат. Поэтому с целью контроля излеченности рекомендуется ПЦР-диагностика не ранее, чем через 1 месяц после окончания терапии.
• Специальная дорогостоящая высокотехнологичная аппаратура, для работы на которой необходим подготовленный и обученный персонал.

Подготовка к сдаче анализа

В период беременности желудочно-кишечный тракт подвергается большой нагрузке. При этом очень часто наблюдается изжога, боль в эпигастральной области и др. Риск развития язвы очень высокий, поэтому будущая мама должна пройти обследование на выявление данной инфекции, чтобы избежать возможных нарушений.

Иммунологические методы основаны на свойстве антител слипаться с антигеном. Для исследования антитела со специальными метками соединяются с анализируемым образцом, в результате, при наличии в материале Helicobacter pylori, образуются комплексы антиген-антитело.

Результаты анализов на хеликобактер пилори может интерпретировать только врач, он же ставит окончательный диагноз и назначает подходящую терапию. Однако некоторые выводы можно сделать и самостоятельно изучив бланк с результатами.

Подготовка к анализу кала

• Относительно высокую стоимость анализа.
• Сохранение фрагментов ДНК микроба в фекалиях и после эрадикации. Даже если лечение успешно пройдено и бактерия отсутствует в организме, ещё спустя какое-то время фрагменты ДНК обнаруживаются в биологическом материале и стул тест на хеликобактер может дать положительный результат. Поэтому с целью контроля излеченности рекомендуется ПЦР-диагностика не ранее, чем через 1 месяц после окончания терапии.
• Специальная дорогостоящая высокотехнологичная аппаратура, для работы на которой необходим подготовленный и обученный персонал.

• Высокая точность: даже незначительного количества генетического материала достаточно для исследования с большим процентом достоверности, приближающимся к 99%.
• Быстрота исследования. 2 суток достаточно для анализа, но существуют экспресс-способы, позволяющие установить диагноз за несколько часов.
• Безболезненность. Способ атравматичен, неинвазивен. Позволяет обследовать маленьких детей, пожилых, ослабленных пациентов, которым противопоказана ФГДС с биопсией и другие эндоскопические манипуляции.
• Для точного результата не обязательно обнаружение ДНК-фрагментов именно S или спиралевидных форм, части кокковых микробов (наиболее встречающихся в испражнениях) тоже подходят для анализа.

Анализ кала на антиген хеликобактер пилори инвитро

Диагностический анализ на выявление в организме микроорганизма Хеликобактер Пилори посредством проведения ПЦР распространен во всем мире. Для проведения анализа достаточно сдать кал, никаких инвазивных процедур не требуется (как, например, в случае с ФГДС методом диагностики).

К кому и куда обращаться?

Впервые обнаруженная более века назад только в 1994 году вредоносная бактерия была официально признана одной из главных причин рецидивирующих гастритов и язв желудка. Ученые Робин Уорелл и Барри Маршал не один год посвятили изучению хеликобактер пилори и способам ее обезвреживания, за что были удостоены Нобелевской премии по медицине в 2005 году.

Чувствительность БУТ в зависимости от количества биоптатов варьирует в пределах 80–90% [26] (по другим данным – от 61 до 74% [27]). Увеличение количества биоптатов, их забор из двух отделов желудка (из тела и антрума) позволяют увеличить чувствительность БУТ [28]. При использовании качественных тестов и нескольких гастробиоптатов, хорошей обработке биопсийных щипцов специфичность теста может достигать 95–100% [25, 26] (по другим данным – 90% [17]). Ложноположительные результаты наблюдаются редко и могут быть обусловлены присутствием других уреазосодержащих бактерий, таких как Proteus mirabilis, Citrobacter freundii, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae и Staphylococcus aureus. Ложноотрицательные результаты теста наблюдаются чаще, чем ложноположительные, что не позволяет использовать отрицательный результат для исключения НР [10]. Ложноотрицательные результаты могут быть получены у пациентов, перенесших язвенное кровотечение, на фоне приема ИПП, антибиотиков, препаратов висмута, а также при выраженной атрофии или метаплазии СОЖ [29].

В методиках используются готовые «помеченные» антитела. При обработке ими кала пациента, содержащего антигены (остатки хеликобактерии) возникает реакция соединения со стандартными антителами. Длительность исследования — сутки. Анализ кала на антиген хеликобактер назначается, если у пациента имеются любые симптомы нарушения пищеварения.

Недостатки метода

Методика рассчитана на искусственный синтез отдельных частей ДНК, удвоение и построение цепочки из 30 циклов. Процесс не происходит в случае отсутствия малейших остатков биоматериала. Для реакции необходим прибор ампликатор. Полимераза — фермент, ускоряющий процесс.

К сожалению, в некоторых случаях результаты теста на чувствительность in vitro («в пробирке») могут не совпадать с результатами лечения in vivo (живого организма): в жизни антибиотики, подобранные лабораторным методом, могут быть не столь эффективны.

Молекулярная диагностика

Главный недостаток такого метода – продолжение его достоинства: высокая чувствительность становится причиной получения ложноположительного результата, если произошла контаминация анализируемых материалов.

Показания к взятию кала на определение h. pylori

Низкая достоверность иммунологического и культурального анализа объясняется малымсодержанием антигена в фекалиях: если ПЦР-анализ чувствителен и при наличии 10 клеток, то для достоверного результата других методов клеток должно быть хотя бы в 10 раз больше.

Для достоверности любого анализа к нему нужно правильно подготовиться. Для повышения эффективности любого исследования стоит отказаться от антибиотиков за неделю до сдачи. Среди общих правил можно отметить следующие:

Когда для выявления в организме хеликобактера берется кровь, то в ней определяется концентрация иммуноглобулинов. Антитела относят к нескольким группам: M, G и A. Инструкция, как расшифровать анализ крови, основана на разделении результата на положительный и отрицательный. Первый определяется при уровне антител выше нормы, а второй – при более низком значении или полном отсутствии иммуноглобулинов.

Как сдать кровь на хеликобактер

Этот вид анализа на хеликобактер является более удобным для пациентов, ведь при нем даже не нужно личного присутствия. Кроме того, он проводится без какого-либо травмирования организма. По этой причине такой анализ показан пожилым, детям или же людям с тяжелыми заболеваниями. Забор кала проводится в домашних условиях после 3 суток ограничения:

Стоит отметить, что биоматериал категорически запрещено собирать непосредственно из подгузника или унитаза, так как к калу могут налипнуть инородные бактерии, которые имеют обыкновение искажать результаты исследования. Перед актом дефекации желательно подмыться. С помощью пластмассовой ложечки, крепящейся к крышке приобретенной емкости, необходимо отделить несколько сегментов биоматериала, взятого из различных точек.

• резкое снижение массы тела без каких-либо видимых предпосылок;
• кислая отрыжка;
• ощущение тяжести в области желудка;
• диарея (регулярный жидкий стул);
• обстипация (запоры);
• желудочные боли после каждого приема пищи;
• беспричинная потеря аппетита;
• приступы изжоги;
• метеоризм (чрезмерное скопление газов в ЖКТ, вызывающее вздутие);
• постоянное урчание в животе, не связанное с голодом;
• тошнота;
• непереносимость пищи животного происхождения;
• неутолимая жажда;
• рвота, сопровождающаяся выделением крови;
• повышенное слюноотделение;
• неприятный запах изо рта;
• дисфагия (затрудненный процесс глотания).

Сбор материала

Хеликобактер проявляет устойчивость к ряду антибиотиков – подобное качество способствует лучшей выживаемости организма в менее комфортных условиях обитания

• Боли в желудке после приема пищи.
• Частая отрыжка.
• Повторяющаяся изжога.
• Затруднение во время глотания пищи.
• Метеоризм и урчание в животе.
• Тошнота и рвота.
• Частая диарея и запоры, длящиеся более двух суток.
• Нарушение аппетита и потеря веса без видимой причины.
• Появление крови во время рвоты и дефекации.

Анализ кала

При молекулярном анализе выявляется специфическая ДНК бактерии. Код дублируется на специальном аппарате. При достижении бактерией нужного размера, ее сравнивают с этанолом. Если части ДНК совпадают с оригиналом, то результат теста положительный (хеликтобактериоз выявлен). Методика отличается высокой степенью информативности.

Подготовка тары

Подготовительные меры для анализа кала на хеликобактер пилори включают в себя рекомендации по соблюдению определенного режима питания, а также корректировку медикаментозной терапии (при ее наличии). Если прием назначенных препаратов временно прекратить не получается, то данный нюанс обязательно сообщается врачу.

Давайте вместе будем делать материал еще популярнее, и после его прочтения сделаем репост в удобную для Вас социальную сеть.